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土壤銨態(tài)氮試劑盒說明書

發(fā)布時間:2023/9/21      點擊次數(shù):366

土壤銨態(tài)氮試劑盒說明書

 

微量法 100T/96S

 

注   意 :正式測定之前選擇 2-3 個預期差異大的樣本做預測定。

測定意義:

土壤中的銨態(tài)氮可被土壤膠體吸附,呈交換性銨狀態(tài)氮肥,也可溶解在土壤溶液中,能直接被植物吸收利用,屬于速效性氮素。

 

測定原理:

土壤中的銨態(tài)氮在強堿性介質(zhì)中與次氯酸鹽和苯酚作用,生成水溶性染料靛酚藍,在 625nm

處有特征吸收峰,吸光值與銨態(tài)氮含量成正比。

 

自備實驗用品及儀器:

天平、常溫離心機、可見分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96 孔板、振蕩儀。

 

試劑組成和配制:

提取液:液體 110mL×1 瓶,4℃保存。

試劑一:粉劑×2 瓶,4℃避光保存。臨用前根據(jù)用量每瓶加 4mL 雙蒸水溶解,現(xiàn)配現(xiàn)用。

試劑二:液體 8mL×1 瓶,4℃避光保存。

試劑三:液體 2mL×1 瓶,4℃保存。

 

樣本處理:

按照土壤質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例(建議稱取約 0.1g 新鮮土樣,加入

1mL 提取液),振蕩提取 1h,10000g  ,25℃離心 10min,取上清液待測。

 

測定操作表:

1、 分光光度計/酶標儀預熱 30min,調(diào)節(jié)波長至 625nm,蒸餾水調(diào)零。

2、 操作表

 


空白管

測定管

樣本(μL)


20

提取液(μL)

20


試劑一(μL)

80

80

試劑二(μL)

80

80

充分混勻,25℃靜置 1h

試劑三(μL)

20

20

充分混勻,于微量石英比色皿/96 孔板中,蒸餾水調(diào)零,測定 625nm 處吸光值 A,分別

記為   A 空白管和 A 測定管,△A=A 測定管-A 空白管

 

計算公式

a.用微量石英比色皿測定的計算公式如下

標準曲線:y =0.1522x-0.0009,R2= 0.9993

NH +—N 含量(mg/kg 鮮重)=(△A+0.0009)÷ 0.1522÷W

= 6.57×(△A+0.0009)÷W

W      :樣本質(zhì)量,g

b.用 96 孔板測定的

 

計算公式如下 :

標準曲線:y = 0.0761x-0.0009,R2= 0.9993

NH +—N 含量(mg/kg 鮮重)=(△A+0.0009)÷ 0.0761÷W

= 13.14×(△A+0.0009)÷W

W:樣本質(zhì)量,g

 

注意事項 :

1 .試劑一必須避光低溫保存,配制好的試劑一 4℃保存不能超過 20 天。

2. 浸提液最好在當日完成測定,如果不能完成,可冷凍保存,但不能超過兩天。



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