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血鋅濃度檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書

發(fā)布時(shí)間:2023/10/18      點(diǎn)擊次數(shù):379

血鋅濃度檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書

                                                 微量法100T/96S

 

    意:正式測(cè)定之前選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測(cè)定。

測(cè)定意義:

鋅是必需的微量元素之一,在胰島素和卟啉代謝中也起重要作用。

 

測(cè)定原理:                                                                                                         

pH 8.5~9.5的溶液中,Zn2+與鋅試劑生成藍(lán)色配位化合物,在620nm有最大吸收峰。

 

自備儀器和用品:

離心機(jī)、可調(diào)式移液槍、可見(jiàn)分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板、蒸餾水和無(wú)水乙醇。

 

試劑組成和配制:

試劑一:液體20mL×1瓶,4℃保存。

試劑二:液體15mL×1瓶,4℃保存。

試劑三:粉劑×1瓶,4℃保存。臨用前1天配制,加入15mL無(wú)水乙醇充分溶解,蓋緊,過(guò)夜待用。4℃保存可穩(wěn)定約1個(gè)月,如顏色變黃,則已失效。

標(biāo)準(zhǔn)液:液體×1支,10 μ mol/L Zn2+標(biāo)準(zhǔn)液。4℃保存。

 

測(cè)定操作:

1. 分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀預(yù)熱30 min,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)到620 nm,蒸餾水調(diào)零。

2. 標(biāo)準(zhǔn)液解凍:提前取出標(biāo)準(zhǔn)液,置于室溫下充分解凍后混勻。

3. 空白管:1.5 mL EP管,依次加入100 μL蒸餾水,100μL試劑一,混勻;室溫,13000g,離心10min,小心吸取上清液100 μL,加入0.5 mL EP管,加入100μL試劑二,100μL試劑三,充分混勻后13000g離心取上清,吸取200μL于微量石英比色皿/96孔板,620 nm測(cè)定吸光度,記為A空白管。

4. 標(biāo)準(zhǔn)管:1.5 mL EP管,依次加入100 μL標(biāo)準(zhǔn)液,100 μL試劑一,混勻;室溫,13000g,離心10min,小心吸取上清液100 μL,加入0.5 mL EP管,加入100μL試劑二,100μL試劑三,充分混勻后13000g離心取上清,吸取200μL于微量石英比色皿/96孔板,620 nm測(cè)定吸光度,記為A標(biāo)準(zhǔn)管。

5. 測(cè)定管:1.5 mL EP管,依次加入100 μL血清,200 μL試劑一,混勻;室溫,8000g,離心10min,小心吸取上清液100 μL,加入0.5 mL EP管,加入100μL試劑二,100μL試劑三,充分混勻后13000g離心取上清,吸取200μL于微量石英比色皿/96孔板,620 nm測(cè)定吸光度,記為A測(cè)定管。

注意:空白管和標(biāo)準(zhǔn)管只需測(cè)定一次。

 

血鋅濃度計(jì)算公式

血鋅濃度(μ mol/ L=C標(biāo)準(zhǔn)液×(A測(cè)定管-A空白管)÷(A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管)

= 10×(A測(cè)定管-A空白管)÷(A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管)

C標(biāo)準(zhǔn)液:10 μ mol/L Zn2+ 

 

注意事項(xiàng):

1.        試劑三需提前一天配制,如變黃色則不能再使用。

2.        加入試劑三混勻后,要在30 min內(nèi)完成該管測(cè)定。

3.         Z低檢出限為1μ mol/L


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