精品人妻伦一二三区久久,国产精品久久无码不卡黑寡妇 ,小小水蜜桃在线观看视频,天堂…在线最新版资源

您好!歡迎訪問優(yōu)利科(上海)生命科學(xué)有限公司網(wǎng)站!
全國服務(wù)咨詢熱線:

15021281375

當(dāng)前位置:首頁 > 資料下載 > 糖原磷酸化酶a(Glycogen phosphorylase a,GPa)試劑盒說明書

糖原磷酸化酶a(Glycogen phosphorylase a,GPa)試劑盒說明書

發(fā)布時間:2023/10/27      點擊次數(shù):388

糖原磷酸化酶aGlycogen phosphorylase aGPa)試劑盒說明書

                                            微量法100/96

 

   意 :正式測定前務(wù)必取2-3個預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定

測定意義:

糖原磷酸化酶(Glycogen phosphorylase,GPEC 2.4.1.1))是糖原分解代謝的關(guān)鍵酶,使糖原分子從非還原端逐個斷開α-1,4-糖苷鍵移去葡萄糖基,釋放1-磷酸葡萄糖,直至臨近糖原分子α-1,6-糖苷鍵分支點前4個葡萄糖基處。GP分為有活性的糖原磷酸化酶aGPa)和無活性的糖原磷酸化酶bGPb)兩種形式。糖原的分解主要在GPa的催化下進(jìn)行。

 

測定原理:

未添加激活劑時,GPa催化糖原和無機(jī)磷產(chǎn)生葡萄糖殘基生成糖原和1-磷酸葡萄糖,磷酸葡萄糖變位酶和6-磷酸葡萄糖脫氫酶進(jìn)一步依次催化NADP還原生成NADPH,在340nm下測定NADPH上升速率,即可反映GPa活性。

 

需自備的儀器和用品:

紫外分光光度計/酶標(biāo)儀、臺式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。

 

試劑的組成和配制:

提取液:100mL×1瓶,4保存;

試劑一:液體16 mL×1瓶, 4保存;

試劑二:粉劑×1瓶,-20保存;

試劑三:粉劑×1支,-20保存;

試劑四:粉劑×1支, -20保存;

樣本的前處理:

按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)15~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL提取液),進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4離心10min,取上清,置冰上待測。

 

測定步驟:

1、  分光光度計或酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長至340nm,蒸餾水調(diào)零;

2、  工作液的配制:臨用前將試劑二轉(zhuǎn)移到試劑一中混合溶解待用;用不完的試劑分裝后-20℃保存,禁止反復(fù)凍融。

3、  試劑三的配制:臨用前在試劑三管中加入1mL蒸餾水充分溶解待用;用不完的試劑分裝后-20℃保存,禁止反復(fù)凍融。

4、   試劑四的配制:臨用前在試劑四管中加入1mL蒸餾水充分溶解待用;用不完的試劑分裝后-20℃保存,禁止反復(fù)凍融。

5、   將工作液、試劑三和試劑四置于37預(yù)熱5分鐘;

6、   在微量石英比色皿或96孔板中加入10μL樣本、10μL試劑三、10μL試劑四、10μL蒸餾水和160μL工作液,立即混勻,記錄340nm5min后的A110min后的吸光值A2,計算ΔA=A2-A1。

 

GPa活性計算:

a.用微量石英比色皿測定的計算公式如下:

1)按樣本蛋白濃度計算

單位定義:每mg組織蛋白每分鐘產(chǎn)生1nmol NADPH定義為一個酶活力單位。

GPanmol/min/mg prot)=[ΔA×V反總÷ε×d×109]÷(V×Cpr) ÷T=643×ΔA÷Cpr

2)按樣本鮮重計算

單位定義:每g組織每分鐘產(chǎn)生1nmol NADPH定義為一個酶活力單位。

GPanmol/min/g 鮮重)=[ΔA×V反總÷ε×d×109]÷(W ×V÷V樣總)÷T=643×ΔA÷W

V反總:反應(yīng)體系總體積,2×10-4 L;εNADPH摩爾消光系數(shù),6.22×103 L / mol /cm;d:比色皿光徑,1cm;V樣:加入樣本體積,0.01 mL;V樣總:加入提取液體積,1 mL;T:反應(yīng)時間,5 min;Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/mL;W:樣本質(zhì)量,g。

 

b.96孔板測定的計算公式如下:

1)按樣本蛋白濃度計算

單位定義:每mg組織蛋白每分鐘產(chǎn)生1nmol NADPH定義為一個酶活力單位。

GPanmol/min/mg prot)=[ΔA×V反總÷ε×d×109]÷(V×Cpr) ÷T=1286×ΔA÷Cpr

2)按樣本鮮重計算

單位定義:每g組織每分鐘產(chǎn)生1nmol NADPH定義為一個酶活力單位。

GPanmol/min/g 鮮重)=[ΔA×V反總÷ε×d×109]÷(W ×V÷V樣總)÷T=1286×ΔA÷W

V反總:反應(yīng)體系總體積,2×10-4 L;εNADPH摩爾消光系數(shù),6.22×103 L / mol /cm;d96孔板光徑,0.5cm;V樣:加入樣本體積,0.01 mL;V樣總:加入提取液體積,1 mL;T:反應(yīng)時間,5 min;Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/mLW:樣本質(zhì)量,g。


文件下載    圖片下載    
優(yōu)利科(上海)生命科學(xué)有限公司
地址:金大公路8218號1幢
郵箱:1431486511@qq.com
傳真:
關(guān)注我們
歡迎您關(guān)注我們的微信公眾號了解更多信息:
歡迎您關(guān)注我們的微信公眾號
了解更多信息
无需付费真人直播视频| 久久av喷吹av高潮av欧美| 久久久久无码精品国产H动漫| 丰满熟妇乱又伦在线无码视频| 99久无码中文字幕一本久道| 被仇人调教成禁脔h虐| 国产大片b站免费观看推荐| 丰满熟妇岳av无码区hd| 99精品久久久久久久婷婷| 亚洲JLZZJLZZ少妇| 试看20分钟做受| 人与禽性视频77777| gogo全球专业高清摄影| 免费av在线观看| 日日噜噜噜噜夜夜爽亚洲精品 | 精品丝袜av在线观看视频| 色欲色香天天天综合www| 久久亚洲精品中文字幕无男同| 麻花豆传媒剧国产mv的特点| 香港60部三级未删版电影| 国产精品无码V在线观看| 熟妇人妻久久中文字幕| 亚洲日韩AV无码中文字幕美国| 97国产av传媒视频在线观看| 男男sm调教腐文| 996久久国产精品线观看| 巨大巨粗巨长 黑人长吊| 99热最新成人国产精品| AV天堂午夜精品一区| 夜躁狠狠综合亚洲色噜噜狠狠| 好男人资源在线看免费的| 熟妇人妻水多爽中文字幕| 欧美精品九九99久久在免费线| 无码国产精品一区二区免费16 | 久久久中文久久久无码| 国产偷v国产偷v亚洲高清| 地铁跑酷国际服下载| 久久精品夜色国产亚洲AV| 他底下好硬蹭着我想要| 色欲色香天天天综合网WWW | 精产国品一二三产品区别图片 |