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豬乙腦病毒抗體檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫法)

簡要描述:豬乙腦病毒抗體檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫法)用于檢測豬血清中豬乙腦病毒抗體,可用于豬乙腦病毒疫苗免疫效果評價。

  • 更新時間:2024-06-28
  • 廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家
  • 生產(chǎn)地址:上海
  • 訪  問  量:858

詳細(xì)介紹

品牌YLKBIOCAS/
分子式/純度詳詢
分子量/貨號YLK-1030E
規(guī)格96T×1/盒、96T×2/盒供貨周期現(xiàn)貨
應(yīng)用領(lǐng)域化工,生物產(chǎn)業(yè)

【產(chǎn)品名稱】

通用名:豬乙腦病毒抗體檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫法)

英文名:Test Kit for Antibodies to Porcine Japanese Encephalitis Virus ELISA

【包裝規(guī)格】 96T×1/盒、96T×2/

【預(yù)期用途】 豬乙型腦炎又名日本乙型腦炎是由豬乙腦病毒(Porcine Japanese Encephalitis VirusJEV引起的一種蚊媒性、急性人畜共患傳染病,病豬主要表現(xiàn)為妊娠母豬流產(chǎn)、產(chǎn)死胎,公豬睪丸腫。

本試劑用于檢測豬血清中豬乙腦病毒抗體,可用于豬乙腦病毒疫苗免疫效果評價

【原    理】

    豬乙腦病毒抗體檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫法)系由預(yù)包被豬乙型腦炎病毒重組E2蛋白的酶標(biāo)板、酶標(biāo)記物及其他配套試劑組成,應(yīng)用酶聯(lián)免疫法(ELISA)原理檢測豬血清、血漿樣本中豬乙型腦炎病毒抗體。實驗時在酶標(biāo)板中加入對照血清和待檢樣本,經(jīng)溫育后若樣品中含有豬乙型腦炎病毒抗體,則將與酶標(biāo)板上抗原結(jié)合,經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的其他成分后;再加入酶標(biāo)記物,與酶標(biāo)板上抗原抗體復(fù)合物發(fā)生特異性結(jié)合;再經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的酶標(biāo)記物,在孔中加TMB底物液,與酶反應(yīng)形成藍(lán)色產(chǎn)物,顯色深淺與樣品中的特異性抗體含量成正相關(guān);加入終止液終止反應(yīng)后,產(chǎn)物變?yōu)辄S色;用酶標(biāo)儀在450nm波長測定各反應(yīng)孔中的吸光值,即可知樣品是否含有豬乙型腦炎病毒抗體。

【試劑盒組成】

序號

名稱

規(guī)格(96T×1

規(guī)格(96T×2

1.

酶標(biāo)板

96T×1

96T×2

2.

酶標(biāo)記物  (紅蓋)

11ml×1

11ml×2

3.

樣品稀釋液 (黃蓋)

50ml×1

50ml×1

4.

20X濃縮洗滌液

40ml×1

40ml×1

5.

底物液A  (白蓋)

6ml×1

11ml×1

6.

底物液B  (黑蓋)

6ml×1

11ml×1

7.

終止液  (黃蓋)

6ml×1

11ml×1

8.

陽性對照  (紅蓋)

1.0 ml×1

1.5 ml×1

9.

陰性對照  (綠蓋)

1.0 ml×1

1.5 ml×1

10.

蓋板膜

1

2

11.

自封袋

1

1

12.

說明書

1

1

13.

稀釋板

1

2

   

【儲存及有效期】 28℃避光保存,有效期為12個月。

包被板開封后請于28℃避光保存,避免受潮。使用期限為2個月。

【適用儀器】 450nm、630nm波長的酶標(biāo)儀,37℃恒溫設(shè)備,可調(diào)微量移液器。

【樣品準(zhǔn)備】

1.取動物全血按常規(guī)方法制備血清,要求血清清亮,無溶血、無污染。樣品1周內(nèi)可于28℃保存,長期需置-20℃保存。

2.用樣品稀釋液將待檢血清按40倍稀釋(如5μl血清加入195μl樣品稀釋液中,混勻)。陰、陽性對照不用稀釋。

3.濃縮洗滌液使用前應(yīng)恢復(fù)至室溫使沉淀溶解,然后用蒸餾水或去離子水作20倍稀釋成工作洗滌液。

【檢驗方法】

1.使用前將試劑盒置室溫30分鐘,恢復(fù)至室溫。

2.取所需用量酶標(biāo)板條,設(shè)空白對照1孔、陰性/陽性對照各2孔,未用的板條盡快密封,28℃保存。

3.空白對照孔加樣品稀釋液100μl;陰、陽性對照孔分別加入陰、陽性對照100μl;樣品孔每孔加入稀釋后的樣品100μl。

4.混勻,置37℃反應(yīng)30分鐘。

5.扣去孔內(nèi)液體,每孔加350 ul工作洗滌液,靜置30秒后棄去,重復(fù)洗滌5次,拍干。

6.每孔加酶標(biāo)記物100μl(空白孔除外)。置37℃反應(yīng)30分鐘。

7.洗滌,同步驟5

8.每孔依次加底物液A、底物液B50μl,混勻,37℃避光反應(yīng)10分鐘。

9.每孔加終止液50μl,混勻,于450nm(可用630nm作參比波長)測定各孔吸光值(A值),無參比波長用空白孔調(diào)零(即所有孔吸光值減去空白孔吸光值)。

【參考值】 實驗正常的情況下,陰性對照≤0.10,陽性對照≥0.6。

【檢驗結(jié)果的解釋】

1.樣品A0.38為陽性;樣品A值在0.20.38之間為可疑;樣品A值<0.2為陰性。

2.本實驗結(jié)果為陰性或可疑時表明豬只抗體水平不足,建議補打相應(yīng)疫苗。

【試驗方法的局限性】

    該試驗僅作為定性檢測豬血清、血漿中豬乙型腦炎病毒抗體,根據(jù)A值高低可作抗體水平強、中、弱的粗略評估。

【注意事項】

1.實驗操作時需戴手套、穿工作衣,嚴(yán)格健全和執(zhí)行消毒隔離制度,各種實驗廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。

2.終止液具有腐蝕性,應(yīng)避免接觸皮膚和衣物,如不慎接觸請立即用大量自來水沖洗。

3.酶標(biāo)板從冷藏環(huán)境中取出時應(yīng)恢復(fù)至室溫方可開袋,未用完的酶標(biāo)板需放入有干燥劑的密封袋中保存。

4.濃縮洗滌液在低溫時容易結(jié)晶,使用時需恢復(fù)至室溫以*溶解。

5.洗滌時各孔均需加滿液體,防止孔口有游離酶不能洗凈。

6.用于檢測的樣品應(yīng)保持新鮮。

7.試驗結(jié)果的判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn)。

8.不同批號試劑組分不得混用。

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