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當前位置:首頁 > 產(chǎn)品中心 > 科研細胞 > 原代細胞 > 復蘇/凍存人小梁網(wǎng)細胞

人小梁網(wǎng)細胞

簡要描述:人小梁網(wǎng)細胞分離自眼球組織。小梁網(wǎng)由角膜基質(zhì)纖維、后界膜和角膜內(nèi)皮向后擴展而成,覆蓋在鞏膜靜脈竇的內(nèi)側(cè)。小梁網(wǎng)細胞在眼內(nèi)壓調(diào)節(jié)中起著關(guān)鍵作用。

  • 更新時間:2024-07-09
  • 廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家
  • 生產(chǎn)地址:上海
  • 訪  問  量:283

詳細介紹

品牌ATCC貨號YLK-XB0626h
規(guī)格5*10^5供貨周期現(xiàn)貨
主要用途科研應(yīng)用領(lǐng)域化工,生物產(chǎn)業(yè)
組織來源眼球

人小梁網(wǎng)細胞

產(chǎn)品名稱 :人小梁網(wǎng)細胞

產(chǎn)品貨號 :YLK-XB0626h

組織來源 :眼球

產(chǎn)品規(guī)格 :5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶


細胞簡介:

小梁網(wǎng)細胞分離自眼球組織。小梁網(wǎng)由角膜基質(zhì)纖維、后界膜和角膜內(nèi)皮向后擴展而成,覆蓋在鞏膜靜脈竇的內(nèi)側(cè)。小梁網(wǎng)細胞在眼內(nèi)壓調(diào)節(jié)中起著關(guān)鍵作用。小梁網(wǎng)細胞內(nèi)有特定的神經(jīng)遞質(zhì)和神經(jīng)肽受體,其中包括腎上腺素、乙酰膽/堿和神經(jīng)肽Y。青光眼是由于眼內(nèi)壓力升高而造成的一種不可逆致盲眼病,小梁網(wǎng)細胞的體外培養(yǎng)是青光眼病因?qū)W研究的重要手段之一。

在小梁網(wǎng)細胞中,一長串的血管活性多肽和生長因子能夠觸發(fā)細胞內(nèi)信號傳導機制,小梁網(wǎng)細胞可合成不同類型的細胞外基質(zhì)蛋白以及金屬蛋白酶。形態(tài)學觀察可見,剛從組織塊長出的原代細胞,形態(tài)各異,多數(shù)呈星狀或不規(guī)則形。細胞有胞突,核橢圓形,胞體肥大,胞漿豐富,且可見吞噬顆粒。隨著細胞的增生及相互融合為單層,細胞的形態(tài)趨于一致。胞漿的色素顆粒及胞突消失,排列緊密呈類似上皮細胞的扁橢圓形或不規(guī)則形。胞體透亮,包膜清晰。


質(zhì)量檢測

優(yōu)利科生物實驗室分離的該細胞經(jīng)Vim entin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有H IV -1、H BV 、H C V 、支原體、細菌、酵母和真菌等。


培養(yǎng)信息

培 養(yǎng)  基 :含F(xiàn)BS、生長添加劑、Penicillin、Streptom ycin等
換液頻率 :每2-3天換液一次
生長特性 :貼壁
細胞形態(tài) :梭形、多角形
傳代特性 :可傳1-2代 傳代比例 1:2
消 化  液 :0. 25% 胰蛋白/酶
培養(yǎng)條件 :氣相 :空氣,95% 。C O2,5%


客戶收到細胞后,請按照以下方法進行操作

1. 取出T25細胞培養(yǎng)瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。

2. 貼壁細胞消化
1) 吸出T25細胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細胞一次。
2) 添加0.25%胰蛋白/酶消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中,輕微轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培養(yǎng)瓶底后,吸出多余胰蛋白/酶消化液,37℃溫浴1-3min。倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后,再加入5ml完培終止消化。
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按傳代比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代,然后補充新鮮的完培至5mL,置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。
4) 待細胞貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后按照換液頻率更換新鮮的完培。
3. 細胞收貨脫落
1) 收集所有細胞懸液,1000rpm,離心5min,保留沉淀。
2) 添加0.25%胰蛋白/酶消化液0.5mL至離心管中,重懸沉淀,放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min)。消化完向離心管內(nèi)加入5ml完培終止消化。
3) 經(jīng)1000rpm離心5min丟棄上清,用5ml完培基重懸沉淀,接種于新的培養(yǎng)瓶內(nèi)。
4) 待細胞貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后按照換液頻率更換新鮮的完培(37℃預熱)。
5) 原瓶內(nèi)貼壁細胞按正常消化處理。
4. 細胞實驗

因原代細胞貼壁特殊性,貼壁的原代細胞在消化后轉(zhuǎn)移至其他實驗器皿(如玻璃爬片、培養(yǎng)板、共聚焦培養(yǎng)皿等)時,需要對實驗器皿進行包被,以增強細胞貼壁性,避免細胞因沒貼好影響實驗。包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2) ,多聚賴氨酸PLL(0.1mg/ml),明膠(0.1%),依據(jù)細胞種類而定。懸浮/半懸浮細胞無需包被。


注意事項

1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月。

2. 在細胞培養(yǎng)過程中,請注意保持無菌操作。
3. 傳代培養(yǎng)過程中,胰/酶消化時間不宜過長,否則會影響細胞貼壁及其生長狀態(tài)。
4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數(shù)各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態(tài),便于和公司技術(shù)部溝通。由于運輸?shù)脑?,個別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請及時和我們聯(lián)系,詳盡告知細胞的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。

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