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人外周血淋巴細(xì)胞

簡要描述:人外周血淋巴細(xì)胞分離自外周血;外周血是除骨髓之外的血液,臨床上常用一些方法把骨髓中的造血干細(xì)胞釋放到血液中,再在從血液中提取分離得到造血干細(xì)胞,我們把這樣得到的干細(xì)胞稱為外周血干細(xì)胞,在二十一世紀(jì)初人類開始的生命方舟計劃中首ci提出外周血這一新概念。淋巴細(xì)胞(lym phocyte)是白細(xì)胞的一種,是體積最小的白細(xì)胞。

  • 更新時間:2024-07-09
  • 廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家
  • 生產(chǎn)地址:上海
  • 訪  問  量:298

詳細(xì)介紹

品牌ATCC貨號YLK-XB0691h
規(guī)格5*10^5供貨周期現(xiàn)貨
主要用途科研應(yīng)用領(lǐng)域化工,生物產(chǎn)業(yè)
組織來源 血液組織

人外周血淋巴細(xì)胞

產(chǎn)品名稱 :人外周血淋巴細(xì)胞

產(chǎn)品貨號 :YLK-XB0691h

組織來源 :血液組織

產(chǎn)品規(guī)格 :5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶


細(xì)胞簡介:

外周血淋巴細(xì)胞分離自外周血;外周血是除骨髓之外的血液,臨床上常用一些方法把骨髓中的造血干細(xì)胞釋放到血液中,再在從血液中提取分離得到造血干細(xì)胞,我們把這樣得到的干細(xì)胞稱為外周血干細(xì)胞,在二十一世紀(jì)初人類開始的生命方舟計劃中首ci提出外周血這一新概念。淋巴細(xì)胞(lym phocyte)是白細(xì)胞的一種,是體積最小的白細(xì)胞。

其由淋巴器官產(chǎn)生,主要存在于淋巴管中循環(huán)的淋巴液中,是機(jī)體免疫應(yīng)答功能的重要細(xì)胞成分,是淋巴系統(tǒng)幾乎全部免疫功能的主要執(zhí)行者,是對抗外界感染和監(jiān)控體內(nèi)細(xì)胞變異的一線“士兵"。淋巴細(xì)胞是一類具有免疫識別功能的細(xì)胞系,按其發(fā)生遷移、表面分子和功能的不同,可分為T 淋巴細(xì)胞(又名T 細(xì)胞)、B淋巴細(xì)胞(又名B細(xì)胞)和自然殺傷(N K )細(xì)胞。

T細(xì)胞和B細(xì)胞都是抗原特異性淋巴細(xì)胞,它們的最初來源是相同的,都來自造血組織。T淋巴細(xì)胞隨血循環(huán)到胸腺,在胸腺激素等的作用下成熟,而B細(xì)胞在骨髓中分化成熟。當(dāng)受抗原刺激后,T淋巴細(xì)胞即轉(zhuǎn)化為淋巴母細(xì)胞,再分化為致敏T淋巴細(xì)胞,參與細(xì)胞免疫,其免疫功能主要是抗胞內(nèi)感染、瘤細(xì)胞與異體細(xì)胞等;而B淋巴細(xì)胞是先轉(zhuǎn)化為漿母細(xì)胞,再分化為漿細(xì)胞,產(chǎn)生并分泌免疫球蛋白(抗體),參與體液免疫,其功能是產(chǎn)生抗體,提呈抗原,以及分泌細(xì)胞內(nèi)因子參與免疫調(diào)節(jié);N K 細(xì)胞不依賴抗原刺激而自發(fā)地發(fā)揮細(xì)胞毒效應(yīng),具有殺傷靶細(xì)胞的作用。


質(zhì)量檢測

優(yōu)利科生物實驗室分離的該細(xì)胞經(jīng)Vim entin免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有H IV -1、H BV 、H C V 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。


培養(yǎng)信息

培 養(yǎng)  基 : 含F(xiàn)BS、生長添加劑、Penicillin、Streptom ycin等
換液頻率 : 每2-3天換液一次
生長特性 : 懸浮
細(xì)胞形態(tài) : 圓形
傳代特性 : 不增殖;不傳代
傳代比例 : 不傳代
消 化  液 : 0.25% 胰蛋白/酶
培養(yǎng)條件 : 氣相:空氣,95% ;C O2,5%


客戶收到細(xì)胞后,請按照以下方法進(jìn)行操作

1. 取出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。

2. 貼壁細(xì)胞消化
1) 吸出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細(xì)胞一次。
2) 添加0.25%胰蛋白/酶消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中,輕微轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培養(yǎng)瓶底后,吸出多余胰蛋白/酶消化液,37℃溫浴1-3min。倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后,再加入5ml完培終止消化。
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按傳代比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代,然后補充新鮮的完培至5mL,置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。
4) 待細(xì)胞貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后按照換液頻率更換新鮮的完培。
3. 細(xì)胞收貨脫落
1) 收集所有細(xì)胞懸液,1000rpm,離心5min,保留沉淀。
2) 添加0.25%胰蛋白/酶消化液0.5mL至離心管中,重懸沉淀,放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min)。消化完向離心管內(nèi)加入5ml完培終止消化。
3) 經(jīng)1000rpm離心5min丟棄上清,用5ml完培基重懸沉淀,接種于新的培養(yǎng)瓶內(nèi)。
4) 待細(xì)胞貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后按照換液頻率更換新鮮的完培(37℃預(yù)熱)。
5) 原瓶內(nèi)貼壁細(xì)胞按正常消化處理。
4. 細(xì)胞實驗

因原代細(xì)胞貼壁特殊性,貼壁的原代細(xì)胞在消化后轉(zhuǎn)移至其他實驗器皿(如玻璃爬片、培養(yǎng)板、共聚焦培養(yǎng)皿等)時,需要對實驗器皿進(jìn)行包被,以增強細(xì)胞貼壁性,避免細(xì)胞因沒貼好影響實驗。包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2) ,多聚賴氨酸PLL(0.1mg/ml),明膠(0.1%),依據(jù)細(xì)胞種類而定。懸浮/半懸浮細(xì)胞無需包被。


注意事項

1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月。

2. 在細(xì)胞培養(yǎng)過程中,請注意保持無菌操作。
3. 傳代培養(yǎng)過程中,胰/酶消化時間不宜過長,否則會影響細(xì)胞貼壁及其生長狀態(tài)。
4. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天每個倍數(shù)各拍幾張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和公司技術(shù)部溝通。由于運輸?shù)脑颍瑐€別敏感細(xì)胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請及時和我們聯(lián)系,詳盡告知細(xì)胞的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤、回訪直至問題得到解決


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