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土壤硝態(tài)氮試劑盒說明書

發(fā)布時間:2023/10/10      點擊次數(shù):368

土壤硝態(tài)氮試劑盒說明書

                                       微量法100T/96S

 

 

   :正式測定之前選擇2-3個預期差異大的樣本做預測定。

測定意義:

硝態(tài)氮是指硝酸鹽中所含有的氮元素,土壤中的有機物分解生成銨鹽,被氧化后變?yōu)橄鯌B(tài)氮。土壤中硝態(tài)氮是高等植物吸收氮的主要形式之一,其含量直接關系到作物的產(chǎn)量與品質(zhì)。

 

測定原理:

在濃酸條件下,NO3-與水楊酸反應,生成硝基水楊酸,硝基水楊酸在堿性條件下(PH>12)呈黃色,在一定范圍內(nèi),其顏色深淺與含量成正比,可比色測定計算得硝態(tài)氮含量。

 

自備實驗用品及儀器:

蒸餾水、天平、常溫離心機、可見分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96孔板、振蕩儀。

 

試劑組成和配制:

試劑一:粉劑×2支,4℃避光保存。臨用前根據(jù)用量每支加1mL濃硫酸充分溶解。

試劑二:液體50mL×1瓶,4℃保存。

 

樣本處理:

按照土壤質(zhì)量(g):蒸餾水體積(mL)15~10的比例(建議稱取約0.1g新鮮土樣,加入1mL蒸餾水)加入蒸餾水,置于振蕩儀中振蕩提取1h25℃,10000g離心10min,取上清待測。

 

測定操作表:

1、   分光光度計或酶標儀預熱30min以上,調(diào)節(jié)波長至410nm,蒸餾水調(diào)零。

2、   操作表(于EP管中加入下列試劑)


空白管

測定管

樣本(μL


10

蒸餾水(μL

10


試劑一(μL

20

20

充分混勻,25℃靜置30min

試劑二(μL

475

475

混勻,渦旋振蕩,使出現(xiàn)的沉淀充分溶解,轉移200uL至微量石英比色皿/96孔板中測定410nm處吸光值A,△A=A測定管-A空白管

 

計算公式:

a.        用微量石英比色皿測定的計算公式如下

標準曲線:y=0.0156x+0.0073,R2=0.9997

 

 

NO3 N含量(mg/kg鮮重)=(△A-0.0073÷ 0.0156÷W÷V樣總)

                =64.1×(△A-0.0073÷W

V樣總:加入提取液體積,1mLW:樣本質(zhì)量,g

 

b.       96孔板測定的計算公式如下

標準曲線:y=0.0078x+0.0073R2=0.9997

NO3 Nmg/kg鮮重)=(△A-0.0073÷ 0.0078÷W÷V樣總)

                =128.2×(△A-0.0073÷W

V樣總:加入提取液體積,1mL,W:樣本質(zhì)量,g

 

注意事項:

1.        硝酸根不為土壤膠體吸附,且易溶于水,很容易在土壤內(nèi)部移動,所以測定此指標時應注意采樣深度一致。

2.        土壤經(jīng)風干或者烘干很容易引起NO3 N的變化,所以最好采用新鮮土壤進行測定,以準確反映該指標含量。

3.        試劑一配制好后盡快使用,4℃可保存一周。

4.        試劑一和試劑二均具有強腐蝕性,操作時需做好防護措施。

5.        Z低檢出限為100μg/kg。


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